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本制品是使用紫外分光光度法检测羧肽酶A活性的检测试剂盒，适用于所有包含羧肽酶A的产品，包括但不限于牛胰腺来源羧肽酶A的酶活测定。

羧肽酶A水解底物溶液，使溶液在255nm处吸光度值发生变化，以255nm处吸光度值的变化计算羧肽酶A的酶活。

• 使用便捷，用户只需准备待测样本。
  
• 本试剂盒1个羧肽酶A活性单位的定义是在25℃ pH7.5的条件下，每分钟能催化1mg底物所需的酶量为1个酶活性单位。
  
• 待测样本中不得有其它羧肽酶的污染。
  
• 本制品足够100次羧肽酶A活性测定实验。
  
• 本制品只可用于科研。

• 实验前将羧肽A样本稀释液放置于冰上预冷。
  
• 配制羧肽酶A底物溶液：将羧肽酶A底物干粉加29mL10×羧肽酶A底物干粉稀释液，再加水至290mL总体积，使羧肽酶A底物干粉充分溶解混匀，制备成底物溶液工作液。每次使用后需置于-20℃条件下避光保存。
  
• 将待测样本用预冷的羧肽A样本稀释液稀释成适当浓度。
  
• 在25℃恒温条件下按下表进行加样，总体系为3mL：
  

  步骤	空白对照（mL）	N个样品（mL）
  底物溶液工作液	2.9	2.9
  羧肽酶A样本稀释液	0.1	-
  迅速加入待测酶液，立即混匀并计时	-	0.1

  
  
• 用光径为1cm的比色皿测定样本及空白对照的吸光度值，每30秒读取一次各管吸光度值（A），读取3分钟。
  
• 以A对时间作图，取反应最初线性部分，计算每分钟吸光度值A的增加值（ΔA/分钟）为：
  
  Δ_{A255nm/分钟}=ΔA _{样品/分钟}-ΔA _{空白/分钟}
  
  
• 羧肽酶A活性计算方法：
  
  单位/mg=ΔA255_nm/分钟÷（0.30×mg酶/mL反应混合液）
  
  羧肽酶A底物溶液在255nm处的克分子消光系数为0.3×10⁶。